幽门螺旋杆菌(H.pylori,Hp)感染与慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡、胃粘膜相关淋巴瘤和胃腺癌的发生有关,WHO已经将Hp列为第一类致癌因子。常用的Hp检测方法很多，各有其优点和不足，目前常用的检测方法有HE、EH、Giemsa、甲苯胺蓝染色及免疫组化标记方法，其每种方法各有优缺点。版《中国慢性胃炎共识意见》，推荐用较简便的姬姆莎（Giemsa）染色方法，国内用免疫组化检测Hp报道较少。为了适合临床和科研，探索敏感性和特异性高的新方法，我们对HE、EH、Giemsa染色及免疫组化标记方法进行对比观察。
材料和方法
1材料 收集我科年12月～年4月胃镜室送检标本,病理诊断为“慢性胃炎”或“胃溃疡”病例60例,找出蜡块,重新切片,每个蜡块各切4张,分别用于HE常规染色、EH染色、改良Giemsa染色及免疫组化染色。
2方法
（1）HE染色:按常规操作进行。
（2）EH染色：切片常规脱蜡至水，伊红染色2-3min，自来水洗1-2min，苏木精染色1-2min,自来水洗1-5min,切片晾干，二甲苯透明，中性树胶封固。
（3）改良Giemsa染色:将配制好的Giemsa贮存液与PH7.0磷酸缓冲液按1：4配制成Giemsa工作液，切片脱蜡至水,用蒸馏水洗2～3次,入Giemsa氏工作液50℃加热孵化25-30分钟，1%醋酸分化，蒸馏水洗,用滤纸吸干,用正丁醇脱水,常规透明、封固。
（4）免疫组化方法按照说明书进行。
结果
我们把按上述四种染色方法染色的切片，光镜下在非肠化处寻找观察Hp的显示情况，以查见Hp菌体1条以上判定为阳性，无为阴性，结合Hp与组织背景对比度、染色时间和观察结果等分析，详见附表。
表1
染色方法染色时间Hp与组织背景对比度成本HE30-40分钟差低EH15分钟差低改良Giemsa30-40分钟较好低IHC90分钟好略高染色方法阳性例数阴性例数总数阳性率HE%EH.70%改良Giemsa%IHC.30%HE染色（图1）：Hp菌体呈蓝灰色，短杆状，略呈S型，组织背景蓝色，组织结构显示清楚，Hp与组织对比度差。IHC阳性率分别与其他三种方法比较进行X2检验，差异无显著性（p0.05）
EH染色（图2）：Hp菌体呈紫红色，形态同HE染色，组织背景蓝色偏红，组织结构显示清晰，Hp与组织对比度差。
改良Giemsa染色（图3）：Hp菌体呈蓝灰色，形态同前，组织背景亮蓝色，Hp与组织对比度尚可。
免疫组化染色（图4）：Hp菌体呈棕黄色形态同前，部分呈团块状，组织背景细胞核浅蓝色，组织结构不清晰，Hp与组织对比度强。
讨论
我国和其他发展中国家是Hp感染的高发区。Hp感染通常缺乏临床表现特征，幽门螺旋杆菌感染的诊断主要依靠实验室检测。常用的Hp检测方法很多，取胃粘膜做Hp细菌培养最可靠,被称为诊断HP感染的“金标准”。但由于其培养条件和技术要求高,医院缺少相应的技术和设备,而且在抗生素药物治疗后Hp形态会发生改变，无法做细菌培养，且丧失尿素酶活性。故替代金标准的探索对于临床筛选与疗效观察是非常必要的。
我们比较了IHC和2种特染以及常规HE染色检测Hp，结果显示在Hp很多的情况下，四种染色方法均能很好地检测出Hp，但是HE、EH和改良Giemsa染色Hp菌体和周围组织背景对比不鲜明，在Hp少的时候，高倍镜下寻找困难，需要借助油镜仔细辨认，阅片时间较长。相比之下，IHC敏感性及特异性较高，在镜下寻找Hp更容易,可以检测组织中Hp菌体和残片，Hp菌体呈棕黄色且菌体更粗大，甚至呈团块状，而背景为浅蓝色，对比鲜明，较其他方法更直观，也更节约阅片时间，增加了Hp的检出率。IHC缺点是染色时间比其他3种方法更长,费用高。我们认为，IHC方法成熟，便于医院病理科开展业务，特别适合胃镜活检标本量较大的情况，值得推广。
参考文献略
（作者：医院病理科刘莉在此致谢）
（注：文中观点仅代表作者观点）
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